1.引言
冷冻毛细管是常用的分离和纯化生物大分子的方法之一,它可以将生物大分子在低温下快速冷冻并制得毛细管内冰晶,进而分离浓缩出分子。毛细管的冷冻方法对于制备纯度高的生物大分子至关重要,因此了解冷冻毛细管的方法尤为重要。
2.放置位置
在进行毛细管的冷冻过程中,毛细管应当被放置在光学显微镜上的光马达中间位置。这里是光路较好且光学显微镜的光马达处于一个比较稳定的温度环境,在这种情况下,制得的冰晶比较均匀且不会产生振动和偏移。毛细管放置位置的选取对于制备冰晶的均匀性和整齐性具有重要的影响。
3.冷冻方式
毛细管的冷冻方式主要有两种,一种是在液氮中进行冷冻,这种方法需要将毛细管放到一个液氮的容器中,它的缺点是冷却速度比较快,不利于制出较大的冰晶,但其优点是可以减少空气对毛细管的影响。另一种方式是采用物理对象来作为毛细管的液体载体,如金属棒等,将毛细管与载体放置在相同的温度环境中,可以减少由于毛细管与周围条件的不同而导致的冰晶形状不一致问题。
4.注意事项
在进行毛细管的冷冻前,应该将毛细管完全浸入冷凝剂中,以避免产生泡沫和其它不必要的物理过程。冷冻后应该尽早将毛细管取出,以减少冰晶之间的相互作用以及在取出后快速溶解毛细管中的液体,使其尽可能保持其形态和空间结构的稳定性。冷冻毛细管是一项细致迅速的操作,需要在进行操作前深入了解其原理和方法。