1. 乌龟的外部性状
观察乌龟的外部性状是最简单的区分公母乌龟的方法。为了更好地观察，最好将乌龟放在一个浅水池中，让其自由活动。公乌龟的外部性状大多比较突出，一般有以下几个特征:
爪子的尺寸一般比较大，也更加靠外部
龟壳的长度一般比较明显，外展的程度也较大
尾巴比较粗短，而且靠下
背板比较突出，头部比较大
而母乌龟则相对比较内敛，性状比较平均，没有太多的特征：爪子的尺寸会较小，龟壳长度平均，尾巴相对较长而细，背板也比较平均。当然，这只是一种简单的方法，前提是得到的公母乌龟年龄相当。
2. 母乌龟的腹部差异
母乌龟的腹部有一个明显的特征就是徽标脐部上方的个体学特征。作为产卵的基部位置，雌性乌龟腹部尺寸比较大，同时在很多种类中，腹部上有一个明显的凹陷。这个凹陷是用来适应放单个卵的大小的，因为卵通常比雄性乌龟的睾丸要大许多。
当然，这个标识并非所有乌龟都有。有些雌性乌龟的腹部变化可能并不显著，而且作为乌龟年龄的另一种判断标准，有些年纪较小的乌龟可能对此也并不适用。因此，观察乌龟的腹部差异需要结合其他的因素来考虑。
3. 观察乌龟的行为习惯
乌龟的行为习惯也是一种判断其性别的方式之一。因为不同性别的乌龟在性行为时，表现出的行为习惯也是不同的。比如，雄性乌龟在性行为期间，一般会表现得比较激进，会四处张望，满怀激情地寻求配偶。而雌性乌龟在性行为期间，一般会表现得比较内敛，更多的是被动地等待雄性乌龟的攻击。
此外，乌龟的食欲也可以用来区分雌雄。 因为雌性乌龟在产卵前一般都不再进食，食欲会下降，而雄性乌龟则会继续进食。当然，要注意这只是一个大致的方向，因为每种乌龟性格都不同，有些乌龟即使是母乌龟也不会进食。
4. 通过显微镜观察乌龟结构
最后，更为准确的判断方法需要通过显微镜来观察乌龟的生殖结构。显微镜通过观察乌龟的卵巢和睾丸来确定其性别。在这种情况下，卵巢通常比睾丸大，由于其位置较深，因此需要仔细观察。不仅如此，要想确认乌龟的真实性别，还需要专业的人员操作，通常拥有更丰富的知识和经验。
不过，通过上述几种方式，我们就可以比较准确地区分公母乌龟了。不同的判断方式在准确性上各有差异，因此，需要结合各种判断方式来获取更为准确的结果。
